引言
褪黑激素受体（G蛋白偶联受体MT1和MT2）与人体昼夜节律的生理功能相关，可作为睡眠障碍和抑郁患者的药物靶点，作者基于MT1晶体结构，从1.5亿分子库中虚拟筛选，发现了调节昼夜节律的褪黑素受体激动剂。
先睹为快
蛋白靶点
褪黑激素受体（人源G蛋白偶联受体MT1）
筛选化合物库
ZINC数据库中1.5亿‘lead-like’化合物(http://zinc15.docking.org)
计算方法
分子对接（Molecular docking）
计算软件
DOCK3.7 (http://dock.compbio.ucsf.edu/DOCK3.7/).
计算流程
基于MT1晶体结构，通过DOCK3.7软件对接1.5亿个虚拟分子，优先考虑结构匹配和化学结构新颖性，合成并测试了38个排序靠前的分子，发现15个活性分子(470pM~6μM)，但是这些化合物对MT1选择性不强，进一步通过结构类似物的合成改造，发现选择性激动剂, 小鼠体内实验证实了化合物调节昼夜节律的作用。
褪黑激素受体（G蛋白偶联受体MT1和MT2）与人体昼夜节律的生理功能相关，这两种受体可作为睡眠障碍和抑郁患者的药物靶点，但目前MT1选择性配体的报道寥寥无几，这大大阻碍了对昼夜节律生物学的理解和靶向治疗的发展。
作者收集了ZINC库中超过1.5亿个“lead-like”分子（http://zinc15.docking），其特征是具有良好的物理性质，例如，脂水分配系数-水分配系数cLopP≤3.5，分子质量≤350Da，然后使用DOCK3.7对接到MT1的活性位点。DOCK3.7（图1）在MT1正构位点中以平均160多万个结合模式（取向×构象）对每个库分子进行取样，整个库产生超过72万亿个复合物，并对每个结合模式与受体位点的物理互补性进行评分。
为了寻求结构多样性，通过拓扑相似性对排名前30万的分子进行聚类，得到65323个簇，并消除与ChEMBL23中已知的MT1和MT2配体相似的簇。对前10000个团簇中得分最高的分子进行了检测，以确定其是否与识别MT1晶体结构中配体的关键残基结合，是否有新的极性相互作用，包括Q181、N162、T1782和N255，以及与A158、G104和F179的主链原子的氢键（图2）。
在最佳评分组内，对所有成员进行检查，并对最符合这些标准的成员进行优先排序。最终选择40个分子进行从头合成和测试，这些分子的排名处于16到246721（0.00001%~0.1%）。在成功合成的38个分子中（95%的完成率），有15个化合物(图3)对人类MT1和MT2受体中或两者都有活性，命中率为39%（以活性化合物的数量/物理测试化合物的数量计算）。
但是这些活性化合物主要体现在MT2，因此需要进一步对化合物进行优化，合成了131个类似物，其中94个化合物有活性。其中两个具有新颖拓扑结构选择性的MT1可逆激动剂UCSF7447和UCSF3384。在黄昏给予这些MT1选择性反向激动剂时，小鼠昼夜节律时钟提前了1.3-1.5小时，这种激动剂样作用在MT1敲除老鼠中被消除，但在MT2基因敲除的小鼠中没有。这项研究阐明了MT1选择性配体可以调节褪黑激素受体生物学功能。
图1.从大型分子库对接发现新型褪黑激素受体配体
图片来源Nature
图2.MT1对接复合物的结合模式示意图
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图3. 15个活性小分子的化学结构
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图4. MT1选择性可逆激动剂和MT2选择性激动剂药代动力学
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参考文献
Stein, R.M., Kang, H.J., McCorvy, J.D. et al. Virtual discovery of melatonin receptor ligands to modulate circadian rhythms. Nature (2020). DOI: 10.1038/s41586-020-2027-0